流动相配置过程中应该避免的坏习惯

在配置流动相时,应避免以下坏习惯,这些习惯可能会导致液相色谱系统污染:

1. 在添加有机相后测量流动相的pH值:在水溶液中,pH值被校准以提供正确的pH值。如果你用添加了有机相的水溶液来测量pH值,pH值就会与有机相添加前的pH值不同。
2. 不使用缓冲盐:缓冲盐的加入是用来控制和修正流动相中PH值的改变的。样品基质、空气中的CO2、水中的杂质都会造成流动相PH值的改变,而PH值的改变会影响样品的保留、峰形、峰面积参数。
3. 没有在正确的缓冲区间使用缓冲盐:每个缓冲盐都有一定的缓冲范围,在此范围内它提供了最佳的pH稳定性。在这个范围外,缓冲盐在抵抗pH值变化方面是无效的。所以要么在正确的范围内使用缓冲盐,要么选择一个缓冲范围覆盖所需pH值的缓冲盐。
4. 向有机相中加入缓冲盐:如果将水相的缓冲溶液加入到有机相中,会大大增加缓冲盐析出的风险。缓冲盐的析出在初期可能并不明显,但会对仪器的各个部件都会产生一定影响。
5. 梯度洗脱时直接用泵去混合流动相并且流动相比例从0%开始:现在的液相色谱能够非常高效的进行在线脱气和流动相混合。但是将梯度洗脱比例从0%开始,会有比较大的出现气泡和沉淀的风险。
6. 没有使用正确的pH值修饰酸或碱作为缓冲液:缓冲溶液的修饰酸或碱,只使用生成缓冲盐的酸或碱。例如,磷酸钠缓冲液只能用磷酸或氢氧化钠调节。
7. 没有在方法中说明缓冲液的全部信息:例如只在方法中写“称5克磷酸钠溶入1000毫升水”。缓冲盐的类型决定其pH缓冲范围,而缓冲盐中所需物质的浓度决定了缓冲强度。例如:5g的无水磷酸钠和5g的一水磷酸钠具有不同的缓冲强度,会影响保留率。
8. 使用仪器时不调查之前使用的流动相情况,直接用纯有机溶剂冲系统:如果之前的方法在B通道使用缓冲溶液,而这次没有经过调查就直接在B通道使用了纯的有机溶剂,那么就会造成该通道缓冲盐析出、出现堵塞等风险。
9. 将溶剂瓶中的流动相用干为止:溶剂瓶中的流动相如果用干,会导致仪器中出现气泡等问题。
10. 仅使用超声来给流动相脱气:超声脱气有一定的脱气作用,但完全脱气的效果并不理想。所以在此建议使用真空脱气机进行在线脱气。

 

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